Диагностика глистов-паразитов

В статье представлены наиболее информативные методы диагностики кишечных паразитов.

Таблица. Сравнение различных методов диагностики глистов и простейших

Метод диагностики Простейшие Гельминты
Трофозонты Цисты Ооцисты Яйца Личинки Яйца остриц
Нативный мазок с физ. раствором и раствором Люголя + +
Като +/- + +/- +/-
Калантарян +/- + +/-
Уксусно-эфирный        (10% уксусная кислота) + +/-
Уксусно-эфирный          (5% уксусная кислота) + +/- + +/- +/-
Формалин-эфирный (10%-формалин) + +/- + + +/-
Комплексный метод исследований фекалий из консерванта (КТ-ФЭО-МЦН) + + + + + +
Метод липкой ленты +

Диагностическая система КТ-ФЭО-МЦН

Оптимальным методом является диагностическая система КТ-ФЭО-МЦН (консервант Турдыева-формалин-эфирное обогащение — модификация Циля-Нильсена), разработанная в Институте медицинской паразитологии и тропической медицины имени Е.И. Марциновского.

Консервант Турдыева: 0,2 % водный раствор нитрита натрия — 80 мл, раствор Люголя (к 1:4, 1:2) — 8 мл, формалин концентрированный — 10 мл, глицерин — 2  мл.

Метод доступен, экономичен и информативен. КТ-ФЭО-МЦН позволяет выявлять в единой пробе трофозоиты, цисты, ооцисты простейших, яйца и личинки гельминтов. В консерванте Турдыева трофозоиты и цисты простейших сохраняют морфологию и блеск, присущие им в свежем состоянии. Кроме того, простейшие в консерванте окрашиваются как в мазке с раствором Люголя, что сохраняет стереотип восприятия и облегчает работу лаборанта. Отсутствие спирта в составе консерванта Турдыева дает возможность продолжительного микроскопирования мазка. Обогащение взвеси фекалий из консервирующей жидкости формалин-эфирным методом позволяет, не нарушая структуры объектов, выявлять паразитов даже при незначительном содержании их в фекалиях. Все это исключительно важно при массовых паразитологических исследованиях.

Сущность метода заключается в следующем: фекалии трехкратно собирают в пенициллиновый флакон с 5-6 мл консерванта Турдыева. Сбор проводится в течение 3 дней при ежедневном стуле, при склонности к запорам интервал сбора материала увеличивается. Рекомендуемый объем фекалий с каждого стула — горошина. Соотношение суммарного объема, трехкратно собранного материала (с лесной орех) и консерванта Турдыева — 1:3. Флакон с консервирующей жидкостью при добавлении очередной порции фекалий встряхивают до получения гомогенной взвеси.

Метод КТ (Консервант Турдыева)

Доставленный в лабораторию флакон с фекалиями при необходимости снова тщательно встряхивают, суспензию отстаивают. Затем осторожно глазной пипеткой со дна флакона берут осадок для приготовления двух и более препаратов с раствором Люголя и изучают под микроскопом при увеличении: окуляр х10, объектив х8, затем объектив х40.

Метод КТ-ФЭО

Собранные во флакон с консервантом Турдыева фекалии тщательно перемешивают и фильтруют через один слой марли в мерную центрифужную пробирку. К 4-4,5 мл фильтрата добавляют до 8 мл 10% формалина и 2 мл эфира. Пробирку закрывают пробкой (от пенициллинового флакона) и энергично встряхивают. После центрифугирования в течение 3 минут при 1500 об/мин палочкой осторожно отделяют от стенок пробирки образовавшуюся фекальную пробку и содержимое выливают, перевернув пробирку вверх дном. Излишки влаги со стенок пробирки удаляют ватным тампоном. Из осадка на дне пробирки готовят два и более препаратов, окрашенных раствором Люголя, и микроскопируют при увеличении: окуляр х10, объектив х8, затем объектив х40.

Метод КТ-ФЭО-МЦН

Дополнен модифицированным методом Циля-Нильсена для определения ооцист криптоспоридий в фекалиях. Обогащенный осадок, оставшийся на дне пробирки, переносят на предметное стекло и круговыми движениями готовят мазок. После тщательного высушивания мазок фиксируют 20-30 минут в смеси Никифорова. Снова высушивают, окрашивают 45 минут раствором карболового фуксина (наливают краску на стекло) и промывают проточной водой. Обесцвечивают 20-60 секунд в 10% растворе серной кислоты (до прекращения отхождения розовых облачков). Тщательно промывают проточной водой. Окрашивают 5% раствором малахитового зеленого в 10% этиловом спирте. Ополаскивают проточной водой, высушивают на воздухе и просматривают под микроскопом. Увеличение: окуляр х10, объектив х90 с масляной иммерсией.

Метод липкой ленты

Для диагностики энтеробиоза рекомендуется специальный метод липкой ленты, что позволяет уменьшить долю ложноотрицательных результатов. На каждого ребенка вместе с флаконом с консервантом Турдыева выдается 2-3 стекла с липкой лентой. Отпечатки с перианальных складок рекомендуется делать до утреннего туалета (пока ребенок находится в постели) с периодичностью в 1-2 дня.

Метод выявления антител к Тохосаrа canis

В последние годы все шире используется метод выявления антител к антигенам Тохосаrа canis (Т. canis) c использованием иммуноферментной системы АО «Вектор-Бест» (Новосибирск). Обследование детей проводилось нами только по показаниям с учетом клинических признаков, эпиданамнеза и данных о содержании эозинофилов в крови обследуемых.

Метод копроиммунодиагностики лямблиоза

Одним из современных методов, обладающих высоким диагностическим потенциалом, является метод копроиммунодиагностики лямблиоза, который выявляет в водных экстрактах фекалий специфический антиген лямблий GSA-65. Мы работали с тест-системой ProSpecT Giardia Microplate Assay, Alexon, USA. Этот копроантиген представляет собой молекулу гликопротеина с молекулярным весом 65,00, продуцируемого простейшим в кишечнике хозяина. Копроантиген выявляется тест-системой как в «немые периоды» — когда численность паразитов в кишечнике ниже порога паразитологического метода, так и в прелатентный период. Это обеспечивает раннюю диагностику лямблиоза и снижает долю ложноотрицательных результатов. После удаления паразита антиген GSA-65 исчезает в течение 2 недель. Эффективность метода высокая: чувствительность и специфичность — 98 %.

Уральский НИИ дерматовенерологии и иммунопатологии МЗ РФ, 2004г.

комментарии 0
Оставить комментарий

Отправить ответ

wpDiscuz